Принцип метода

Моча минерализуется с серной кислотой, образовавшийся пирофосфат железа разрушается гидролизом на кипящей водяной бане, раствор нейтрализуется ацетатом аммония, железо восстанавливается сульфатом гидразина, и проводится цветная реакция с сульфонированным батофенантролином.

Необходимые реактивы

1. Кислота серная концентрированная.

2. Перекись водорода, 30%-ный раствор в воде (пероксид).

3. Сульфат гидразина, насыщенный раствор: 2,5 г вещества заливают 100 мл воды.

4. Аммония ацетат, насыщенный раствор: к 148 г соли добавляют 100 мл воды.

5. Раствор сульфонированного батофенантролина.

6. Калибровочный раствор железа, содержащий 30 мкмоль/л.

Ход исследования

В колбу Кьельдаля помещают 5 мл исследуемой мочи и 1 мл концентрированной серной кислоты и нагревают на электрической плитке с закрытой спиралью или на песчаной бане; не должно быть бурного кипения и образования пены, которая поднималась бы в горлышко колбы. В конце сжигания должны образовываться тяжелые белые пары, занимающие нижнюю часть колбы. Когда материал потемнеет и объем его уменьшится примерно наполовину, добавляют несколько капель пергидроля, что способствует просветлению пробы. Сжигание проводят до тех пор, пока раствор не станет совсем светлым. После охлаждения доливают 10 мл воды и ставят на кипящую водяную баню на 5–10 мин, после чего объем пробы доводят водой до 20 мл. Отбирают 4 мл, к которым прибавляют 0,3 мл насыщенного раствора сульфата гидразина и 1,2 мл насыщенного раствора ацетата аммония, после чего фотометрируют при длине волны 535 нм в кювете с длиной оптического пути 1 см, прибавляют 0,5 мл раствора сульфонированного батофенантролина и оставляют на 1 ч, затем повторно фотометрируют в тех же условиях.

В норме этим методом железо в моче не определяется.