Реакция основана на осаждении глобулинов насыщенным раствором карболовой кислоты.
Необходимый реактив
Насыщенный раствор карболовой кислоты – 100 г карболовой кислоты – растворяют в 1 л воды, встряхивают и оставляют в термостате при 37 °С на 6–8 ч. После пребывания при комнатной температуре в течение 7 дней надосадочную жидкость сливают и используют в качестве реактива.
Специальное оборудование: не требуется.
Ход исследования
На часовое стекло, положенное на черную бумагу, наливают 1 мл реактива и по краю наносят 1–2 капли ликвора.
Оценка результатов
В случае положительного результата в месте соприкосновения реактива с используемой спинномозговой жидкостью образуется молочно-белое облачко, переходящее в муть. Для обозначения результатов реакции Панди пользуются системой 4 плюсов:
1) слабая – 1+;
2) заметная опалесценция – 2+;
3) умеренное помутнение – 3+;
4) значительное помутнение – 4+.
Реакция основана на свойстве солей в определенной концентрации осаждать избирательно глобулины.
Необходимый реактив
Насыщенный раствор сульфата аммония – 85 г соли – растворяют в 100 мл воды. Полученный раствор выдерживают 48 ч при комнатной температуре и после фильтрования употребляют для постановки реакции. Реакция раствора нейтральная.
Ход исследования
В пробирку вносят 0,5 мл ликвора, приливают 0,5 мл реактива и перемешивают. В контрольную пробирку наливают 1 мл воды.
Оценка результатов
Оценку проводят в течение 3 мин после смешивания ликвора с реактивом. Сравнение опыта с контролем производят на темном фоне. Для выражения результатов пользуются системой 4 плюсов:
1) значительное помутнение – + + + +;
2) умеренное – + + +;
3) заметная опалесценция – + +;
4) слабая опалесценция – +.
Клиническое значение
Реакция дает относительное представление о нормальном и патологическом содержании глобулинов. Слабая опалесценция (+) свойственна и нормальной спинномозговой жидкости при небольшом повышении общего белка (больше 0,2 г/л). Наиболее достоверное представление о содержании глобулинов можно получить при электрофоретическом обследовании ликвора, которое целесообразно проводить при положительной реакции Апельда.
Коллоидные растворы, не изменяющиеся под влиянием различных разведений нормальной спинномозговой жидкости, в патологически измененной жидкости меняют степень дисперсности в зависимости от разведения жидкости, при этом изменяются цвет, растворимость и может выпадать осадок.
Необходимые реактивы
1. 1%-ный водный раствор чистого хлорного золота.
2. Хлорид натрия, 4,5 г на 1 л воды.
3. Цитрат натрия, 1%-ный раствор в воде.
4. Рабочий раствор хлорного золота.
Готовят следующим образом: к 95 мл воды приливают 1 мл 1%-ного хлорного золота, нагревают до 90–95 °С.
К рабочему раствору прибавляют 5 мл до появления вишнево-красного окрашивания. В процессе кипячения окраска раствора меняется, переходя из синей в фиолетовую, затем красную и вишневую. Раствор может храниться в темном месте до 2 месяцев.
Ход исследования
Готовят разведения спинномозговой жидкости. Берут 11 пробирок, в первую наливают 0,9 мл, а в остальные – по 0,5 мл 0,45%-ного раствора хлорида натрия. В первую наливают 0,1 мм спинномозговой жидкости и после перемешивания переносят 0,5 мл во 2-ю пробирку, из последней 0,5 мл смеси удаляют. Таким образом исключают серию разведений от 1 : 10 до 1 : 5120. В 11-ю пробирку спинномозговую жидкость не добавляют, она является контрольной. Во все пробирки добавляют до 2,5 мл рабочего раствора хлорида натрия. После энергичного встряхивания пробирок их оставляют на 16–18 ч при комнатной температуре.
Оценка полученных результатов. Если спинномозговая жидкость нормальная, смесь всех 11 пробирок остается пурпурно-красной или в одной из первых пробирок фиолетово-пурпурной. При патологическом ликворе на дне пробирок появляется осадок, а цвет жидкости меняется. Изменение цвета принято регистрировать цифрами:
0 – отсутствие окраски;
1 – красно-фиолетовый цвет;
2 – фиолетовый;
3 – красно-синий;
4 – синий;
5 – светло-синий и голубой;
6 – бесцветный.
Цифровое выражение по пробиркам: отрицательная реакция – 00 000 000 000; дегенеративная кривая – 666 654 320; воспалительная – 00 124 566 530.
Клиническое значение
При изменении альбумино-глобулинового коэффициента происходит изменение коллоидной реакции. Воспалительный тип реакции Ломге наблюдается при повышенном содержании α- и β-глобулинов, дегенеративный тип реакции бывает за счет увеличения мелкодисперсной фракции белка – альбуминов и снижения содержания глобулинов.
Большое значение имеют глобулиновые реакции при дифференциальной диагностике органических и функциональных нарушений, при неврастении, прогрессивном параличе и латентном сифилисе.