Методы основаны на определении переваривающей способности желудочного содержимого в отношении различных белковых субстратов. Это методы Мета, Уголева, Пятницкого, Туголукова и др. Последний метод определения пепсина унифицирован.

Метод Туголукова. В основе лежит определение протеолитической активности желудочного сока по количеству расщепленного белка.

Реактивы:

1) 2%-ный раствор сухой плазмы на 0,1 г в растворе хлористо-водородной кислоты (НСl);

2) 10%-ный раствор трихлоруксусной кислоты.

О содержании пепсина судят по количеству переваренного белкового субстрата. В специальную центрифужную пробирку (с оттянутым и градуированным нижним концом) вносят 1 мл профильтрованного и предварительно разведенного (1 : 100) дистиллированной водой желудочного содержимого. В контрольную пробирку помещают 1 мл прокипяченного разведенного желудочного содержимого. В обе пробирки добавляют по 2 мл 2%-ного раствора сухой плазмы (в 0,1 г растворе НСl), инкубируют в течение 20 ч при 37 °С. После инкубации добавляют 2 мл 10%-ного раствора трихлор-уксусной кислоты и тщательно перемешивают до получения однородной суспензии. Центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об./мин. Измеряют величину осадка в пробирках и вычисляют показатель переваривания субстрата по формуле:

М = (А – В) × 40 / А,

где М – показатель переваривания;

А – величина осадка в контроле;

В – величина осадка в опытной пробе;

40 – постоянная величина, выведенная экспериментально.

По таблице 30 пересчета показателей переваривания белкового субстрата на содержание пепсина определяют концентрацию пепсина в мг на 100 мл желудочного сока.

Таблица 30

Пересчет показателей переваривания белкового субстрата (раствора сухой плазмы) на содержание пепсина в желудочном содержимом