Обычно у здорового человека скрытая кровь в кале отсутствует. Анализ производится с применением различных скрининговых тестов. Для этого используется бензидиновая или гваяковая пробы. Обычно назначается подготовка больного перед взятием крови для иключения ложноположительных результатов. За трое суток до обследования из рациона питания исключаются мясные продукты, фрукты и овощи, содержащие каталазу и пероксидазу (хрен, огурцы, цветная капуста), отменяют аскорбиновую кислоту, препараты железа, ацетилсалициловую кислоту, нестероидные противовоспалительные средства.

Рекомендуется исследовать кал после трех последовательных дефекаций, пробы берут каждый раз из двух разных мест каловых масс. Диагностически значимым является даже один положительный результат.

Бензидиновая проба. Применяются следующие реактивы: 1%-ный раствор бензидина в 50%-ной уксусной кислоте (при хранении в посуде из темного стекла годен в течение нескольких дней с условием ежедневного контроля), 3%-ный раствор Н₂О₂.

Неразведенный кал тонким слоем наносят на предметное стекло. Мазок кладут в чашку Петри, лежащую на белом фоне, и наносят на него 2–3 капли раствора бензидина и столько же перекиси водорода. При положительной реакции появляется зеленое или синее окрашивание. Интенсивность окраски пропорциональна количеству крови в испражнениях. Если окраска не развивается или появляется позже 2 мин, то проба считается отрицательной. Бензидиновая проба является наиболее чувствительной и дает положительный результат в разведении крови 1 : 100 тыс. – 1 : 250 тыс. В настоящее время этот тест практически не используется, так как дает много ложноположительных результатов и выявляет кровопотери, превышающие 15 мл в сутки.

В клинической практике часто применяется гваяковая проба.

Гваяковая проба. Применяются следующие реактивы: 2%-ная спиртовая настойка гваяковой смолы, ледяная уксусная кислота, 3%-ный раствор Н₂О₂.

На предметное стекло, помещенное в чашку Петри, кладут кусок фильтровальной бумаги, на которую наносят небольшое количество кала в виде мазка. На кал капают 2–3 капли ледяной уксусной кислоты, настойки гваяковой смолы и перекиси водорода. В присутствии крови появляется сине-зеленое или фиолетовое окрашивание. Проба с гваяковой смолой дает положительный результат с разведениями крови 1 : 50 тыс. В настоящее время разработаны тесты, в которых гваяковый реагент нанесен на пластмассовую полоску. Это привело к возможности стадартизировать проведение исследований и диагностировать мелкие кровотечения. Тест становится положительным при концентрации Нb в кале более 2 мг в 1 грамме. Гваяковый тест выявляет скрытую кровь при раке толстой кишки, колоноректальном раке, полипах толстой кишки.

Пирамидоновая проба. Применяются следующие реактивы: 5%-ный спиртовой раствор амидопирина (пирамидона), 3%– ный раствор уксусной кислоты, 3%-ный раствор Н₂О₂.

Небольшой кусочек кала растирают с 4–5 мл воды и фильтруют. К фильтрату добавляют равный объем раствора амидопирина и по 10–12 капель уксусной кислоты и перекиси водорода. В присутствии крови появляется сине-фиолетовое окрашивание. Если через 2 мин окраска не появилась, то проба считается отрицательной. Проба с амидопирином по чувствительности стоит между описанными выше.

Экспресс-тесты. Фирмы «Germed» (ФРГ), «Roham Pharma» (Чехия), «Smith Klein» (США) выпускают бумажные тесты для определения скрытой крови в испражнениях, которые основаны на пробе с гваяковой смолой.

Испражнения наносят на пропитанную гваяковой смолой фильтровальную бумагу, укрепленную на дне небольшого окошка, прорезанного в картонной пластине, и закрывают створкой. С противоположной стороны также имеется створка, которую открывают непосредственно при исследовании, и на фильтровальную бумагу, которая уже пропитана испражнениями, наносят 2–3 капли реактива, в который входят кислота и перекись водорода. При наличии крови на фильтровальной бумаге развивается сине-зеленое окрашивание. Определение крови подобным тестом не ускоряет исследования, но позволяет проводить его у постели больного и значительно упрощает транспортировку испражнений при необходимости исследования только крови.

В последние годы для ранней диагностики рака толстой кишки применяются иммунохимические тесты с использованием специфических антител к гемоглобину человека (наборы типа «Гемоселект» и др.). Они положительные в 97% случаев рака толстой кишки и 60% при аденоматозе (при полипах размером более 1 см).